高中《生物》教材中，曾谈到激素的含量极少，却起着很重要的调节作用。那么，利用黑斑蛙（Ｒａｎａｎｉｇｒｏｍａｃｕｌａｔａ）的变色实验，可以说明激素的生理作用。

１原理
黑斑蛙在我国分布很广。生活于稻田、池溏或小河旁的草丛中，其背部呈深绿色或黄绿色，有不规则的黑斑纹和短纵脊，还有两条较宽的长背侧纵褶。其表皮和真皮内均含有黑色素细胞。色素细胞的胞质流动可将色素颗粒扩散至细胞外周或集中于细胞的中央。色素扩散就使皮肤颜色变深，集中就会使皮肤颜色变浅。而黑色素细胞是受垂体分泌的促黑激素控制的，促黑激素能够使皮肤黑色素细胞中色素粒扩散，体色变黑。

２实验过程和结果
２．１ 采集８只大的黑眶蟾蜍（Ｂｕｆｏｍｅｌａｎｏｓｔｉｃｔｕｓ），其头部沿吻棱、眼眶上缘皮、上下颌缘有明显的黑色线，生活于田野及住宅附近，分布于华南各省，将其放入一个盛有２％乙醚水溶液的大广口瓶中麻醉。麻醉后，仰卧固定于蛙板上，上颌用大头针订在蛙板上，再在下颌穿一线，拉紧并固定之，使下颌保持张开的位置。

２．２ 用左手进一步张大黑眶蟾蜍的口腔，右手用解剖刀沿中线切开上颚粘膜，切口在眼球稍下方处，并将粘膜向两侧拉开，暴露头骨。在蝶筛骨中间小心地用剪刀尖凿开一小洞，直径约３～４毫米即可。通过这个小洞可以清楚地看到脑下垂体，呈小椭圆形，浅粉红色，约有半颗米粒大。用小镊子将垂体夹出放入乳钵中研碎，加入２毫升０．７％生理盐水稀释，即可供注射用。

２．３ 用注射器吸取制备好的脑垂体提取液２毫升，左手拿着一只黑斑蛙，右手将注射针刺入蛙皮下的淋巴囊（它的皮肤不是全部固着于皮下的组织上，仅固着于一定区域，各固着区之间有大的淋巴囊），缓慢地注入脑垂体提取液。拔出针头后，将黑斑蛙放入透明的广口玻璃瓶内。另一只大小与上述相似的黑斑蛙作为对照用，只在其皮下淋巴囊内注入０．７％生理盐水２毫升，随后放入同样大小的广口玻璃瓶内。两只瓶底都预先放一层白沙石及浅水，放入蛙后瓶口都盖一层白色纱布，用橡皮筋扎好。约过３０～６０分钟后，可以看到注射了垂体提取液的黑斑蛙的背部皮肤逐渐由原来的深绿色转变成黑色，而对照用的黑斑蛙皮肤颜色没有改变。